多肽生產(chǎn)方法之合成法是在人們已獲知某種有特定活性的氨基酸組成的序列,利用其生產(chǎn)特定活性肽的方法。合成法制備多肽主要分為化學(xué)合成法、酶合成法和基因重組合成法 [8,9]。
(一)化學(xué)合成法
化學(xué)法合成多肽主要是通過固相或液相合成法制取所需的生物活性多肽。固相合成法常用于實(shí)驗(yàn)室,用于蛋白質(zhì)、多肽等方面的研究,其特點(diǎn)是產(chǎn)品純度高,但成本高、產(chǎn)量低,直接合成的序列短、合成效率低,同時(shí)合成試劑的毒性較大,因此此法一般僅限于實(shí)驗(yàn)室制備。固相合成法基本上只能用于氨基酸數(shù)目較少、分子量較小的多肽的合成,通過固相合成法獲得大分子的多肽仍具有較大難度。與固相合成法相比,液相合成法的優(yōu)點(diǎn)是產(chǎn)品純度高、產(chǎn)量大,適用于工業(yè)生產(chǎn),經(jīng)過不斷地改進(jìn)和完善,可適用在生產(chǎn)價(jià)值高的短鏈或中鏈的保健型活性肽制品。
然而化學(xué)合成成本相對較高,難以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn),合成過程中難免會使用有機(jī)試劑,進(jìn)而造成環(huán)境污染,副反應(yīng)較多,并且合成的目標(biāo)多肽毒性較多,諸多因素限制了化學(xué)合成多肽的發(fā)展。
(二)酶合成法
酶合成法即用蛋白酶催化合成肽,多用于合成相對較短的肽。酶法合成反應(yīng)條件溫和,使用的藥劑毒性低,產(chǎn)物不會消旋,但是反應(yīng)的副產(chǎn)物較多,產(chǎn)率較低。
(三)基因重組法
基因重組法常用于合成肽鏈相對較長的肽,尤其是幾百個氨基酸組成的肽?;蛑亟M法可將調(diào)控多肽合成的基因序列重組到微生物等的遺傳物質(zhì)中,在受體生物中進(jìn)行遺傳物質(zhì)的翻譯表達(dá)。該法的優(yōu)點(diǎn)是通過基因重組的方法可降低天然方法獲取的成本昂貴或產(chǎn)量低下的多肽的生產(chǎn)成本,并且安全性高,但基因重組制備多肽在前期研究技術(shù)難度大,還未應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。